

在暴露的组织外侧放置一块带覆盖玻片的吸力腔(coverslip + suction chamber),通过温和负压使肺表面局部向贴合面靠拢并相对固定,同时不挤压组织(维持血流/气体交换),覆盖玻片允许显微镜客观成像。这样把运动幅度减少到 <~10 μm,使双光子成像和图像平均/去噪成为可能。
主要优点:
动物可以保留更多生理特性:相比完全暴露并机械固定的方法,视窗通过负压固定局部组织,尽量保留整体胸腔生理。
高时间分辨率:由于组织可以很好地得到固定,镜头下不会出现颤抖和样本偏移等不稳定情况,能够实现较长时间的观察和实时分析,可以捕捉快速细胞事件。
便于重复长时序采集:运动量受控,可用图像平均或运动校正后做定量分析。
兼容性:与双光子显微镜、共聚焦显微镜、拉曼、光声等技术兼容。
应用领域:
肺内免疫细胞运动学:细胞如何在毛细血管内被捕获、滚动、穿出或返回血流。
急性肺损伤、炎症与感染模型(LPS、细菌、吸入毒性物质等)的早期动力学观察。
血管通透性/毛细血管渗漏、肺循环动力学与细胞-血管相互作用研究。
神经活动(钙成像)、神经血管耦合、血流调节、阿尔茨海默病研究。
血管生成、肿瘤微环境、免疫细胞迁移。
心肌钙信号、血流动力学、免疫细胞在心脏的迁移。
药物代谢、Kupffer 细胞免疫行为、肿瘤转移。
造血干细胞迁移、肿瘤转移、免疫细胞生成。